1. 為了盡可能延長ACQUITY UPLC和ACQUITY Premier CSH色譜柱的使用壽命,請密切關(guān)注以下方面
●水的品質(zhì)(包括水純化系統(tǒng))
●溶劑品質(zhì)
●流動(dòng)相的制備、儲(chǔ)存和使用期限
●樣品、緩沖鹽和流動(dòng)相的溶解性
●樣品質(zhì)量及其前處理
2. 出現(xiàn)問題時(shí),往往只需要糾正一個(gè)不當(dāng)?shù)牟僮鳌?/span>
3. 請務(wù)必記?。?/span>
●使用在線過濾器裝置,或者優(yōu)選VanGuard保護(hù)柱
●盡可能避免使用100%水相流動(dòng)相,以阻止細(xì)菌滋生
●每24~48小時(shí)更換一次水相流動(dòng)相(如果必須使用100%水相流動(dòng)相)
●每24~48小時(shí)需將舊的100%水相流動(dòng)相丟棄以阻止細(xì)菌滋生
●每次向流動(dòng)相A添加5%~10%有機(jī)溶劑,以調(diào)節(jié)梯度曲線
●用0.2μm濾膜過濾流動(dòng)相的水相部分
●維護(hù)水純化系統(tǒng),使其保持良好的工作狀態(tài)。
●盡可能只使用超純水(18 MΩ•cm)和優(yōu)質(zhì)溶劑。使用HPLC級水,而不是UPLC級水。
●考慮樣品前處理(如固相萃取、過濾等)。
4. 避免事項(xiàng)(在可能的情況下):
●100%水相流動(dòng)相(如果可能)
●HPLC級瓶裝水
●“直接加裝"流動(dòng)相
●使用舊置的水相流動(dòng)相。切記每24~48小時(shí)徹底沖洗流動(dòng)相儲(chǔ)液瓶,并制備新鮮流動(dòng)相
●磷酸鹽緩沖液與高濃度乙腈(如 > 70%)一起使用,可能會(huì)出現(xiàn)沉淀
5. 請勿在觀察到背壓過高或峰分裂時(shí)便認(rèn)定是由于色譜柱失效所引起:
●調(diào)查色譜柱出現(xiàn)故障的原因
●柱壓
●流動(dòng)相是否長菌、沉淀析出和/或樣品的問題
●峰分叉
●樣品質(zhì)量
●進(jìn)樣溶劑的強(qiáng)度
6. 請牢記:通常UPLC流速較低,因此流動(dòng)相消耗會(huì)慢很多(請僅制備所需的流動(dòng)相或?qū)⒍嘤嗟牧鲃?dòng)相冷藏保存)。
7. 流動(dòng)相相關(guān)問題:
●是否在使用100%水相流動(dòng)相?能否在流動(dòng)相A中加入少量有機(jī)溶劑?
●是否要使用0.2 -m濾膜過濾水相流動(dòng)相?
●流動(dòng)相配了多久?是否需要在儲(chǔ)液瓶上注明制備日期?
●每24~48小時(shí)需添加流動(dòng)相還是制備新鮮流動(dòng)相?
●水的質(zhì)量如何?水的質(zhì)量最近有變化嗎?水純化系統(tǒng)是如何工作的?上一次維護(hù)是什么時(shí)候?
●是否在使用pH 7的磷酸鹽緩沖液(在此條件下非常容易滋生細(xì)菌)?
8. 樣品相關(guān)問題:
如果以流動(dòng)相配制的純標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)樣,是否會(huì)出現(xiàn)這些問題?
●如果按照樣品前處理方法(如SPE、過濾等)用水
●制備標(biāo)準(zhǔn)品,是否仍會(huì)出現(xiàn)這些問題?
●樣品是否隨時(shí)間發(fā)生了變化?